Miere terapeutică Manuka: Nu mai este atât de alternativă
Cercetarea mierii medicinale traversează o renaștere semnificativă. De la un remediu folcloric, respins în mare măsură de medicina convențională drept „alternativ”, asistăm acum la un interes sporit din partea oamenilor de știință, a practicienilor clinici și a publicului larg pentru utilizările terapeutice ale mierii. Există mai mulți factori care stimulează acest interes: în primul rând, creșterea rezistenței la antibiotice a multor agenți patogeni bacterieni a determinat interesul pentru dezvoltarea și utilizarea unor antibacteriene noi; în al doilea rând, un număr tot mai mare de studii fiabile și rapoarte de caz au demonstrat că anumite tipuri de miere sunt tratamente foarte eficiente pentru răni; în al treilea rând, mierea terapeutică are un preț premium, iar industria mierii promovează activ studii care îi vor permite să profite de acest lucru; și, în cele din urmă, natura foarte complexă și oarecum imprevizibilă a mierii reprezintă o provocare atractivă pentru cercetătorii din laboratoare. În această lucrare analizăm cercetarea privind mierea de Manuka, de la studiile observaționale asupra efectelor sale antimicrobiene până la lucrările experimentale și mecanistice actuale, care urmăresc să aducă mierea în medicina convențională. Prezentăm lacunele actuale și controversele rămase în înțelegerea modului în care acționează mierea și sugerăm noi studii care ar putea face ca mierea să nu mai fie o alternativă „alternativă”.
Introducere
Mierea a fost folosită ca medicament de-a lungul istoriei omenirii. Una dintre cele mai frecvente și persistente utilizări terapeutice ale mierii a fost ca pansament pentru răni, aproape sigur datorită proprietăților sale antimicrobiene. Odată cu apariția antibioticelor extrem de active în anii 1960, mierea a fost considerată „o substanță lipsită de valoare, dar inofensivă” (Soffer, 1976). Cu toate acestea, criza actuală și în creștere a rezistenței la antibiotice a reînnoit interesul pentru utilizarea mierii, atât ca agent eficient în sine, cât și ca punct de pornire terapeutic pentru dezvoltarea unor noi metode de tratament. Mierea provine de obicei din nectarul florilor și este produsă de albine, cel mai frecvent de albina europeană Apis mellifera, și reprezintă un amestec complex de zaharuri, aminoacizi, compuși fenolici și alte substanțe. Tipurile de miere provenite de la diferite plante cu flori variază considerabil în ceea ce privește capacitatea lor de a distruge bacteriile, iar acest lucru a complicat literatura de specialitate despre miere și a făcut uneori dificilă reproducerea rezultatelor în cadrul unor studii diferite (Allen et al., 1991; Irish et al., 2011). Majoritatea studiilor recente care investighează mecanismul de acțiune al mierii s-au concentrat asupra mierii Manuka active, bine caracterizate și standardizate, produsă de anumite specii de Leptospermum originare din Noua Zeelandă și Australia, care a fost înregistrată ca produs pentru îngrijirea rănilor auprès organismelor medicale de reglementare competente. Prin urmare, dacă nu se specifică altfel, această analiză se va concentra asupra mierii Manuka.
Analize chimice ale mierii Manuka active
Profesorul Peter Molan de la Universitatea Waikato din Noua Zeelandă a fost primul care a raportat activitatea neobișnuită a mierii de Manuka și a început să îi testeze acțiunea împotriva unei game largi de specii bacteriene diferite la mijlocul anilor 1980. Cu toate acestea, deși era clar că și concentrațiile scăzute de miere de Manuka distrugeau agenții patogeni bacterieni, ingredientul activ specific responsabil pentru acest efect a rămas necunoscut timp de mulți ani. Conținutul ridicat de zahăr și pH-ul scăzut fac mierea inhibitoare pentru dezvoltarea microbiană, însă activitatea se menține și atunci când acești factori sunt diluați până la niveluri neglijabile. Multe tipuri de miere produc, de asemenea, peroxid de hidrogen atunci când glucozoxidaza, derivată de la albina meliferă, reacționează cu glucoza și apa. Cu toate acestea, în mierea de Manuka, producția de peroxid de hidrogen este relativ scăzută și poate fi neutralizată de catalază, dar activitatea se menține în continuare. Cauza acestei activități persistente, denumită „activitate non-peroxidică” sau NPA, a fost dezvăluită în cele din urmă în 2008, când două laboratoare au identificat independent metilglioxalul (MGO) în mierea de Manuka (Adams et al., 2008; Mavric et al., 2008). MGO rezultă din deshidratarea spontană a precursorului său, dihidroxiacetona (DHA), o substanță fitochimică naturală prezentă în nectarul florilor de Leptospermum scoparium, Leptospermum polygalifolium și al unor specii înrudite de Leptospermum, originare din Noua Zeelandă și Australia (Adams et al., 2009; Williams et al., 2014; Norton et al., 2015). MGO poate reacționa relativ nespecific cu macromolecule precum ADN-ul, ARN-ul și proteinele (Adams et al., 2008; Mavric et al., 2008; Majtan et al., 2014b) și, teoretic, ar putea fi toxic pentru celulele mamiferelor (Kalapos, 2008). Cu toate acestea, nu există dovezi privind afectarea celulelor gazdă atunci când mierea de Manuka este consumată oral sau utilizată ca pansament pentru răni; într-adevăr, mierea pare să stimuleze vindecarea și să reducă cicatrizarea atunci când este aplicată pe răni (Biglari et al., 2013; Majtan, 2014; Dart et al., 2015). Nu se știe cum exercită această toxicitate aparent selectivă asupra celulelor bacteriene.
Nivelurile ridicate de MGO sau de peroxid de hidrogen produc de obicei mierea cu cea mai mare activitate, însă corelația nu este întotdeauna perfectă, ceea ce sugerează că alte componente ale mierii pot modula activitatea (Molan, 2008; Kwakman et al., 2011; Chen et al., 2012; Lu et al., 2013). Defensina-1 de albină, o peptidă antimicrobiană derivată de la albine, este responsabilă de activitatea mierii Revamil, o miere activă produsă dintr-o sursă care nu a fost dezvăluită, însă aceasta pare să fie modificată structural și inactivă în mierea de Manuka (Kwakman et al., 2011; Majtan et al., 2012). Nivelul leptozinei, o glicozidă întâlnită exclusiv în mierea de Leptospermum, se corelează cu potența și poate modula activitatea antimicrobiană a mierii de Manuka (Kato et al., 2012). În mod similar, pot fi prezenși diverși compuși fenolici cu potențială activitate antimicrobiană, în special în mierea mai închisă la culoare; deși aceștia apar la niveluri puțin probabil să fie inhibitoare prin ei înșiși, pot acționa sinergic unii cu alții sau cu alte componente ale mierii pentru a produce sau modifica activitatea (Estevinho et al., 2008; Stephens et al., 2010). Compușii fenolici pot acționa și ca antioxidanți și pot fi responsabili de proprietățile antiinflamatoare și de vindecare a rănilor ale mierii (Stephens et al., 2010). Trebuie menționat că nu toate speciile de Leptospermum produc miere activă și că, chiar și în mierea de L. scoparium și L. polygalifolium, nivelurile de MGO pot varia de la ∼100 la >1200 ppm (Windsor et al., 2012). Un studiu al activității mierii australiene a constatat că mierea provenită de la plante de Leptospermum care cresc în jurul graniței dintre New South Wales și Queensland era deosebit de activă, însă nu se știe dacă acest lucru se datorează plantei, solului, climei sau altor factori (Irish et al., 2011).
Inhibarea agenților patogeni de către miere
Mierea a fost testată in vitro pe o gamă diversă de agenți patogeni, în special pe cei care pot coloniza pielea, rănile și membranele mucoase, unde este posibil tratamentul topic cu miere. Până în prezent, testele in vitro au demonstrat că mierea de Manuka poate inhiba eficient toți agenții patogeni bacterieni problematici testați (rezumați în Tabelul 1). Un aspect deosebit de important este că izolatele clinice cu fenotipuri de rezistență multiplă la medicamente (MDR) nu prezintă o reducere a sensibilității la miere, ceea ce indică un spectru larg de acțiune, diferit de cel al oricărui antimicrobian cunoscut (Willix et al., 1992; Blair and Carter, 2005; George and Cutting, 2007; Tan et al., 2009). În plus, încercările de a genera în laborator tulpini rezistente la miere nu au avut succes și nu au fost raportate cazuri de izolate clinice cu rezistență dobândită la miere (Blair et al., 2009; Cooper et al., 2010).
TABELUL 1. Specii bacteriene susceptibile la mierea de Manuka terapeutică.
Pe lângă inhibarea celulelor planctonice, mierea poate dispersa și distruge bacteriile care trăiesc în biofilme. Biofilmele sunt comunități de celule în general închise într-o matrice extracelulară produsă de acestea și care se găsesc aderente la suprafețe, inclusiv la nivelul rănilor, dinților, suprafețelor mucoase și dispozitivelor implantate. Microorganismele prezente în biofilme sunt protejate de agenții antimicrobieni și pot provoca infecții persistente, care nu se remit. Mierea de Manuka perturbă agregatele celulare (Maddocks et al., 2012; Roberts et al., 2012) și previne formarea biofilmelor de către o gamă largă de agenți patogeni problematici, inclusiv speciile de Streptococcus și Staphylococcus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Acinetobacter baumannii și Klebsiella pneumonia(Maddocks et al., 2012, 2013; Lu et al., 2014; Majtan et al., 2014a; Halstead et al., 2016). Important este faptul că mierea poate, de asemenea, să perturbe biofilmele deja formate și să distrugă celulele prezente în acestea, deși este necesară o concentrație mai mare decât în cazul celulelor planctonice (Okhiria et al., 2009; Maddocks et al., 2013; Lu et al., 2014; Majtan et al., 2014a). Foarte recent, mierea de Manuka a fost testată pe un biofilm multispecie care conținea Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Pseudomonas aeruginosa și Enterococcus faecalis și s-a constatat că a redus viabilitatea tuturor speciilor, cu excepția E. faecalis, care nu a putut fi eradicat (Sojka et al., 2016). Acest lucru are implicații clinice clare pentru utilizarea mierii pe răni care conțin biofilme, iar înțelegerea modului în care biofilmul îi permite lui E. faecalis să supraviețuiască atunci când în mod normal este distrus de miere reprezintă un domeniu important și interesant pentru studiile viitoare. MGO pare să fie în mare parte, dar nu în totalitate, responsabil pentru inhibarea biofilmelor de către mierea de Manuka, subliniind din nou importanța componentelor suplimentare care modulează activitatea (Kilty et al., 2011; Lu et al., 2014).
Spectrul de activitate al mierii împotriva agenților patogeni nonbacterieni nu este încă bine stabilit. Studii recente care au examinat efectul antiviral al mierii de Manuka au sugerat că aceasta are potențial pentru tratarea virusului varicelo-zosterian (cauza varicelei și a zonei zoster) (Shahzad and Cohrs, 2012) și a gripei (Watanabe et al., 2014). Agenții patogeni fungici ai pielii, inclusiv Candida albicans și speciile de dermatofiți, sunt considerabil mai puțin sensibili la mierea de Manuka decât bacteriile, dar sunt inhibați de mierea cu niveluri ridicate de producție a peroxidului de hidrogen (Brady et al., 1996; Irish et al., 2006). S-a constatat că mierea de Manuka și mierea care nu este de Manuka reduc viabilitatea sporilor microsporidianului Nosema apis, un agent patogen important al albinelor, însă mierea nu a putut vindeca infecția albinelor după ce aceasta se instalase (Malone et al., 2001). Au existat foarte puține studii privind utilizarea mierii împotriva paraziților protozoari sau helmintici, iar acestea nu au folosit miere cu o activitate bine caracterizată, ceea ce face dificilă evaluarea semnificației rezultatelor lor (Bassam et al., 1997; Nilforoushzadeh et al., 2007; Sajid and Azim, 2012).
Introducerea mierii în medicina de masă: studii experimentale și mecanistice recente fac lumină asupra modului în care acționează mierea
Mierea Manuka activă este disponibilă pe scară largă ca agent terapeutic și aliment funcțional, iar majoritatea consumatorilor o consideră un produs holistic, oarecum misterios. Cu toate acestea, lipsa înțelegerii modului în care mierea distruge bacteriile și favorizează vindecarea îi limitează acceptarea de către medicina tradițională, unde este încă considerată „alternativă” sau „complementară”. Marea majoritate a studiilor de cercetare asupra mierii de până acum au fost descriptive; cu toate acestea, studiile recente încearcă să elucideze modul în care acționează mierea și utilizează abordări mecanistice pentru a determina cum acționează la nivel celular și molecular.
Studii ultrastructurale ale celulelor și comunităților bacteriene tratate cu miere
Mierea poate modifica profund dimensiunea și forma celulelor bacteriene, deși amploarea acestui efect variază în funcție de speciile bacteriene. Utilizând microscopia electronică prin transmisie (TEM), culturile de S. aureus tratate cu miere Manuka au prezentat mai multe celule cu septuri finalizate comparativ cu cele tratate cu miere artificială, ceea ce sugerează că celulele au intrat în etapa diviziunii celulare, dar nu au reușit să o finalizeze, deși, la exterior, aceste celule păreau normale la microscopia electronică prin scanare (SEM) (Henriques et al., 2010). Mai recent, imaginile în contrast de fază realizate după tratarea cu o doză subletală de miere Manuka au arătat că celulele de S. aureus și Bacillus subtilis erau semnificativ mai mici și aveau o probabilitate mai mare de a prezenta ADN condensat decât cele care se dezvoltau fără miere (Lu et al., 2013). Este dificil să comparăm direct aceste studii, deoarece au folosit cantități diferite de miere și timpi diferiți de tratare, însă, în ansamblu, rezultatele sugerează o decuplare a creșterii de diviziunea celulară, observată adesea ca răspuns la stresuri nutriționale și de mediu (Silva-Rocha and de Lorenzo, 2010).
S-a raportat că tratamentul cu miere determină culturile speciilor Gram-negative E. coli și P. aeruginosa să prezinte atât celule anormal de scurte, cât și celule anormal de lungi (Lu et al., 2013). În mod interesant, deși P. aeruginosa pare să fie mai puțin susceptibilă la inhibarea de către miere decât alte specii, cu ajutorul microscopiei electronice prin transmisie (TEM) și al microscopiei electronice prin scanare (SEM) au fost observate modificări celulare profunde, inclusiv șanțuri și blebs (proeminențe ale membranelor plasmatice celulare) pe suprafața celulelor și o cantitate substanțială de resturi extracelulare, indicând liza celulară (Henriques et al., 2011). Acest lucru a fost verificat într-un studiu ulterior, folosind colorarea fluorescentă live-dead cu BacLight și microscopia confocală, deși studiul a demonstrat, de asemenea, că a rămas un număr relativ mare de celule vii. Aceste studii au utilizat miere în concentrație de 20% (g/v), mai mare decât CMB pentru tulpina lor de P. aeruginosa, astfel că era de așteptat o inhibare substanțială și moartea unui număr mare de celule. Cu toate acestea, microscopia de forță atomică (AFM), utilizând niveluri subbactericide, a evidențiat în continuare deformări celulare și blebbing substanțiale la celulele tratate cu concentrații egale cu CMI (12%) și jumătate din CMI (6%), împreună cu o liză celulară substanțială (Roberts et al., 2012). Această aparentă degenerare a celulei de P. aeruginosa a fost susținută de analiza PCR cantitativă, care a arătat o scădere de 10 ori a expresiei oprF în celulele tratate cu miere; această genă codifică o porină a membranei externe, importantă pentru stabilitatea structurală (Jenkins et al., 2015a).
Analizele „omics” evaluează răspunsul celulei în ansamblu la inhibarea de către miere
Capacitatea de a evalua rezultatele la nivelul întregii celule a revoluționat studiul interacțiunilor dintre medicamente și agenți patogeni și are o valoare deosebită pentru produsele naturale complexe, precum mierea, unde sunt probabile efecte asupra mai multor procese. Studiile de microarray și proteomice asupra bacteriilor expuse la miere au sugerat inducerea proceselor asociate stresului și suprimarea sintezei proteinelor (Blair et al., 2009; Jenkins et al., 2011; Packer et al., 2012). Deși, în ansamblu, acest lucru este destul de tipic pentru un răspuns la agenți inhibitori, mierea a produs o „semnătură” unică de expresie diferențială, care a inclus numeroase proteine cu funcții ipotetice sau necunoscute, sugerând un mod de acțiune nou. Genele sau proteinele specifice a căror expresie a fost redusă în analizele „omics” ale S. aureus și E. coli O157/H7 au funcții asociate virulenței, detectării cvorumului și formării biofilmului (Lee et al., 2011; Jenkins et al., 2013), iar în cazul P. aeruginosa s-a observat o reducere a expresiei proteinelor implicate în flagelare (Roberts et al., 2015). Aceste fenotipuri sunt esențiale pentru ca agenții patogeni să se stabilească și să producă infecții invazive și indică faptul că, pe lângă inhibarea dezvoltării, mierea poate reduce potențialul patogen al bacteriilor infectante.
Deși sunt încă relativ limitate ca număr și amploare, analizele „omics” efectuate până în prezent sugerează un răspuns celular complex la miere, cu variații considerabile între diferite specii bacteriene. Pentru elucidarea acestei complexități sunt necesare acum abordări avansate de biologie a sistemelor, care să permită contextualizarea datelor, precum și studii de validare care utilizează PCR cantitativ și tulpini cu gene deleționate; acestea pot dezvălui noi abordări pentru terapii medicamentoase menite să inhibe dezvoltarea bacteriană (Hudson et al., 2012).
Interacțiuni între miere și antibiotice convenționale
Pe lângă utilizarea ca agent unic, există posibilitatea folosirii mierii pentru a completa tratamentul cu antibiotice convenționale. Acest lucru poate avea o valoare deosebită atunci când mierea este combinată cu agenți sistemici care pot fi transportați către patul plăgii prin circulația sanguină, în timp ce mierea este aplicată topic. Tratamentele combinate pot, de asemenea, reduce doza terapeutică a agenților antimicrobieni și preveni dezvoltarea rezistenței, iar în unele cazuri pot produce sinergie medicamentoasă, în care activitatea combinată este mai mare decât suma activităților individuale ale fiecărui medicament asociat.
Studiile in vitro care au combinat mierea de Manuka aprobată terapeutic cu agenți antibiotici au identificat un efect sinergic al oxacilinei, tetraciclinei, imipenemului și mupirocinei împotriva dezvoltării unei tulpini de MRSA (Jenkins and Cooper, 2012). În plus, prezența unei concentrații subinhibitorii de miere în combinație cu oxacilina a restabilit sensibilitatea tulpinii de MRSA la oxacilină. Autorii au constatat reducerea expresiei mecR1, care codifică o proteină de legare a penicilinei specifică MRSA (PBP2A), și au sugerat că acesta ar fi un mecanism al sinergiei mierii. A fost identificată, de asemenea, o activitate sinergică puternică între mierea de Manuka și rifampicină împotriva mai multor tulpini de S. aureus, inclusiv izolate clinice și tulpini de MRSA, iar prezența mierii a împiedicat apariția rezistenței la rifampicină in vitro (Müller et al., 2013). Acest lucru are importanță clinică deoarece rifampicina pătrunde bine în țesuturi și abcese și este utilizată frecvent pentru tratarea infecțiilor stafilococice superficiale, dar induce rapid rezistență și, prin urmare, trebuie utilizată în combinație cu un alt agent. O constatare suplimentară a acestui studiu a fost că sinergia nu se datora MGO, deoarece o miere sintetică îmbogățită cu MGO nu a prezentat sinergie cu rifampicina.
Înțelegerea modului în care mierea influențează acțiunea antimicrobienelor cu mecanisme de acțiune bine caracterizate ne poate ajuta, de asemenea, să înțelegem mai bine modul în care mierea afectează agenții patogeni bacterieni. Liu et al. (2014) au extins analiza sinergiei pentru a include antibiotice suplimentare și tulpini diferite de S. aureus și MRSA. Aceștia au sugerat că o susceptibilitate crescută la clindamicină și gentamicină ar putea rezulta din efectul combinat al reducerii sintezei proteinelor de către miere și al inhibării ribozomilor de către antibiotice, în timp ce sinergia cu antibioticele β-lactamice s-ar putea datora stresului oxidativ crescut cauzat de ambii parteneri. Deoarece tulpinile de S. aureus și MRSA au fost la fel de susceptibile la combinația oxacilină-miere, se pare că sinergia nu era probabil cauzată de reducerea expresiei PBP2A. Totuși, într-un izolat clinic de MRSA, nu s-a observat nicio creștere a sensibilității la clindamicină sau gentamicină în prezența mierii, aspect demn de remarcat deoarece este primul caz raportat al unei diferențe de răspuns la miere între MRSA și S. aureus. Investigarea acestei diferențe specifice tulpinii prin analize transcriptomice sau proteomice ar constitui o direcție interesantă pentru cercetările viitoare (Liu et al., 2014).
Dovezi ale eficacității provenite din studii pe animale, rapoarte de caz și studii clinice
Companiile care produc și comercializează miere de Manuka promovează standarde etice ridicate și descurajează utilizarea modelelor animale pentru studierea infecțiilor și vindecării rănilor. Totuși, mierea de Manuka a fost utilizată pentru tratarea animalelor cu răni chirurgicale sau accidentale, în special a cailor, cu rezultate pozitive (Dart et al., 2015; Bischofberger et al., 2016). Rapoarte de caz privind utilizarea mierii pentru răni și ulcere care nu se vindecă au consemnat îmbunătățiri semnificative, cu rezolvarea infecției în cazurile în care antibioticele convenționale eșuaseră (Regulski, 2008; Smith et al., 2009). Cu toate acestea, în pofida acestor rezultate și a dovezilor provenite din numeroase modele in vitro și in vivo care arată că mierea elimină agenții patogeni problematici ai rănilor, datele clinice solide privind mierea de Manuka sunt puține. Există diverse motive pentru aceasta, inclusiv dificultățile tehnice ale desfășurării unui studiu dublu-orb, controlat cu placebo, asupra unei substanțe distincte precum mierea, considerente etice, lipsa de interes a practicienilor clinici și raportul cost-beneficiu pentru companiile apicole, al căror obiectiv îl reprezintă produsele naturale și vânzările fără prescripție medicală, unde mierea de Manuka și pansamentele asociate au deja un preț premium. Aceste aspecte se pot schimba pe măsură ce rezistența la antibiotice erodează opțiunile actuale de tratament, iar cercetările în curs, care evidențiază potențialul mierii, o aduc în atenția practicienilor medicali.
Lacune și oportunități emergente în studiul mierii
În ultima perioadă s-au înregistrat progrese importante în înțelegerea mierii terapeutice, însă utilizarea acesteia în medicina clinică rămâne limitată, chiar și atunci când antibioticele convenționale încep să nu mai dea rezultate. Complexitatea mierii, care este probabil principala sa calitate în eliminarea unor agenți patogeni diverși și prevenirea rezistenței, îngreunează studierea sa, deoarece este probabil ca numeroși factori care acționează împreună să îi influențeze activitatea. Susținem realizarea unor studii mecanistice suplimentare, care să utilizeze miere terapeutică de Manuka înregistrată corespunzător, în special studii bazate pe abordări de biologie sistemică ner reducționiste, împreună cu analize chimice și microbiologice detaliate, pentru a elucida modul în care mierea acționează la nivel molecular, celular și populațional, felul în care acesta poate diferi între tulpini și specii diferite de agenți patogeni microbieni și modul în care răspunde celula gazdă (Tabelul 2). Informațiile obținute din aceste studii pot apoi contribui la orientarea terapiei și la generarea datelor clinice necesare pentru a integra mierea în medicina convențională; nu va mai fi terapia alternativă utilizată doar atunci când toate celelalte opțiuni au eșuat.
TABELUL 2. Studii privind mierea de Manuka: rezultate, lacune și studii viitoare.
Contribuțiile autorilor
Această recenzie a fost redactată de DC, SB, NNC, DB și PB și revizuită critic de RS și EH.
Finanțare
NNC primește sprijin salarial din partea Rural Industries Research and Development Corporation – Honey Bee Program (Grant PRJ-009186).
Declarație privind conflictul de interese
DC, PB și EH raportează sprijin financiar nerambursabil și sprijin nefinanciar sub forma mierii de Manuka din partea Comvita NZ Limited și Capilano Honey Limited; RS este angajat al Comvita NZ Limited, companie care comercializează miere de Manuka de uz medical (Medihoney).
Ceilalți autori declară că cercetarea a fost efectuată în absența oricărei relații comerciale sau financiare care ar putea fi interpretată drept un potențial conflict de interese.
Abrevieri
ESBL, β-lactamază cu spectru extins; MBC, concentrație bactericidă minimă; MGO, metilglioxal; MIC, concentrație inhibitorie minimă; MRSA, Staphylococcus aureus rezistent la meticilină; MRSE, Staphylococcus epidermis rezistent la meticilină; NPA, activitate non-peroxidică; VRE, Enterococcus rezistent la vancomicină.
Referințe
Adams, C. J., Boult, C. H., Deadman, B. J., Farr, J. M., Grainger, M. N. C., Manley-Harris, M. și colab. (2008). Izolarea prin HPLC și caracterizarea fracției bioactive a mierii de Manuka din Noua Zeelandă (Leptospermum scoparium). Carbohydr. Res. 343, 651–659. doi: 10.1016/j.carres.2007.12.011
Adams, C. J., Manley-Harris, M. și Molan, P. C. (2009). Originea metilglioxalului din mierea de Manuka din Noua Zeelandă (Leptospermum scoparium). Carbohydr. Res. 344, 1050–1053. doi: 10.1016/j.carres.2009.03.020
Al Somal, N., Coley, K. E., Molan, P. C. și Hancock, B. M. (1994). Sensibilitatea Helicobacter pylori la activitatea antibacteriană a mierii de Manuka. J. R. Soc. Med. 87, 9–12.
Allen, K., Molan, P. și Reid, G. (1991). Un studiu al activității antibacteriene a unor tipuri de miere din Noua Zeelandă. J. Pharm. Pharmacol.43, 817–822. doi: 10.1111/j.2042-7158.1991.tb03186.x
Allen, K. L. și Molan, P. C. (1997). Sensibilitatea bacteriilor care cauzează mastita la activitatea antibacteriană a mierii. N. Z. J. Agric. Res. 40, 537–540. doi: 10.1080/00288233.1997.9513276
Anthimidou, E. și Mossialos, D. (2012). Activitatea antibacteriană a mierii grecești și cipriote împotriva Staphylococcus aureus și Pseudomonas aeruginosa în comparație cu mierea Manuka. J. Med. Food 16, 42–47. doi: 10.1089/jmf.2012.0042
Balan, P., Mal, G., Das, S. și Singh, H. (2016). Activități antimicrobiene sinergice și aditive ale curcuminei, mierii Manuka și proteinelor din zer. J. Food Biochem. doi: 10.1111/jfbc.12249
Bassam, Z., Zohra, B. I., și Saada, A.-A. (1997). Efectele mierii asupra paraziților Leishmania: un studiu in vitro. Trop. Doctor27, 36–38.
Biglari, B., Moghaddam, A., Santos, K., Blaser, G., Büchler, A., Jansen, G., et al. (2013). Studiu observațional prospectiv multicentric privind îngrijirea profesională a plăgilor cu ajutorul mierii (Medihoney). Int. Wound J. 10, 252–259. doi: 10.1111/j.1742-481X.2012.00970.x
Bischofberger, A., Dart, C., Horadagoda, N., Perkins, N., Jeffcott, L., Little, C., et al. (2016). Efectul gelului cu miere Manuka asupra concentrațiilor factorilor de creștere transformanți β1 și β3, a numărului de bacterii și a histomorfologiei plăgilor cutanate contaminate, pe toată grosimea, de la membrele distale ale cabalinelor. Aust. Vet. J. 94, 27–34. doi: 10.1111/avj.12405
Blair, S., Cokcetin, N., Harry, E. și Carter, D. (2009). Activitatea antibacteriană neobișnuită a mierii de Leptospermum de uz medical: spectrul antibacterian, rezistența și analiza transcriptomului. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 28, 1199–1208. doi: 10.1007/s10096-009-0763-z
Blair, S. E. și Carter, D. A. (2005). Potențialul mierii în gestionarea plăgilor și infecțiilor. J. Austral. Infect. Control 10, 24–31.
Brady, N., Molan, P. și Harfoot, C. (1996). Sensibilitatea dermatofiților la activitatea antimicrobiană a mierii Manuka și a altor tipuri de miere. Pharm. Pharmacol. Commun. 2, 471–473.
Carnwath, R., Graham, E. M., Reynolds, K. și Pollock, P. J. (2014). Activitatea antimicrobiană a mierii împotriva izolatelor bacteriene comune din plăgile ecvine. Vet. J. 199, 110–114. doi: 10.1016/j.tvjl.2013.07.003
Chen, C., Campbell, L., Blair, S. E. și Carter, D. A. (2012). Efectul tratamentului termic asupra proprietăților antimicrobiene ale mierii. Front. Microbiol. 3:265. doi: 10.3389/fmicb.2012.00265
Cooper, R., Jenkins, L., Henriques, A., Duggan, R. și Burton, N. (2010). Absența rezistenței bacteriene la mierea Manuka de uz medical. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 29, 1237–1241. doi: 10.1007/s10096-010-0992-1
Cooper, R. A., Halas, E. și Molan, P. C. (2002a). Eficacitatea mierii în inhibarea tulpinilor de Pseudomonas aeruginosa din arsurile infectate. J. Burn Care Rehabil. 23, 366–370. doi: 10.1097/00004630-200211000-00002
Cooper, R. A. și Molan, P. C. (1999). Utilizarea mierii ca antiseptic în gestionarea infecției cu Pseudomonas. J. Wound Care 8, 161–164. doi: 10.12968/jowc.1999.8.4.25867
Cooper, R. A., Molan, P. C. și Harding, K. G. (1999). Activitatea antibacteriană a mierii împotriva tulpinilor de Staphylococcus aureusdin răni infectate. J. R. Soc. Med. 92, 283–285.
Cooper, R. A., Molan, P. C. și Harding, K. G. (2002b). Sensibilitatea la miere a cocilor Gram-pozitivi cu importanță clinică, izolați din răni. J. Appl. Microbiol. 93, 857–863. doi: 10.1046/j.1365-2672.2002.01761.x
Cooper, R. A., Wigley, P. și Burton, N. F. (2000). Sensibilitatea la miere a tulpinilor multirezistente de Burkholderia cepacia. Lett. Appl. Microbiol. 31, 20–24. doi: 10.1046/j.1472-765x.2000.00756.x
Dart, A., Bischofberger, A., Dart, C. și Jeffcott, L. (2015). O analiză a cercetărilor privind vindecarea rănilor ecvine prin intenție secundară, folosind miere Manuka: recomandări actuale și aplicații viitoare. Equine Vet. Educ. 27, 658–664. doi: 10.1111/eve.12379
Estevinho, L., Pereira, A. P., Moreira, L., Dias, L. G. și Pereira, E. (2008). Efectele antioxidante și antimicrobiene ale extractelor de compuși fenolici din mierea din nord-estul Portugaliei. Food Chem. Toxicol. 46, 3774–3779. doi: 10.1016/j.fct.2008.09.062
French, V. M., Cooper, R. A. și Molan, P. C. (2005). Activitatea antibacteriană a mierii împotriva stafilococilor coagulazo-negativi. J. Antimicrobial Chemother. 56, 228–231. doi: 10.1093/jac/dki193
George, N. M. și Cutting, K. F. (2007). Miere antibacteriană (Medihoney): activitate in vitro împotriva izolatelor clinice de MRSA, VRE și a altor organisme gram-negative multirezistente, inclusiv Pseudomonas aeruginosa. Wounds 19:231.
Halstead, F. D., Webber, M. A., Rauf, M., Burt, R., Dryden, M. și Oppenheim, B. A. (2016). Activitatea in vitro a unei mierii concepute, a mierii de uz medical și a pansamentelor antimicrobiene pentru răni împotriva izolatelor bacteriene clinice producătoare de biofilm. J. Wound Care 25, 93–102. doi: 10.12968/jowc.2016.25.2.93
Hammond, E. N. și Donkor, E. S. (2013). Efectul antibacterian al mierii de Manuka asupra Clostridium difficile. BMC Res. 6:188. doi: 10.1186/1756-0500-6-188
Henriques, A. F., Jenkins, R. E., Burton, N. F. și Cooper, R. A. (2010). Efectele intracelulare ale mierii de Manuka asupra Staphylococcus aureus. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 29, 45–50. doi: 10.1007/s10096-009-0817-2
Henriques, A. F., Jenkins, R. E., Burton, N. F. și Cooper, R. A. (2011). Efectul mierii de Manuka asupra structurii Pseudomonas aeruginosa. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 30, 167–171. doi: 10.1007/s10096-010-1065-1
Hudson, N. J., Dalrymple, B. P. și Reverter, A. (2012). Dincolo de expresia diferențială: căutarea mutațiilor cauzale și a moleculelor efectoare. BMC Genomics 13:356. doi: 10.1186/1471-2164-13-356
Irish, J., Blair, S. și Carter, D. (2011). Activitatea antibacteriană a mierii provenite din flora australiană. PLoS ONE 6:e18229. doi: 10.1371/journal.pone.0018229
Irish, J., Carter, D. A., Shokohi, T. și Blair, S. E. (2006). Mierea are un efect antifungic împotriva speciilor de Candida. Med. Mycol. 44, 289–291. doi: 10.1080/13693780600931986
Jenkins, R., Burton, N. și Cooper, R. (2011). Efectul mierii de Manuka asupra expresiei proteinei universale A de stres la Staphylococcus aureus rezistent la meticilină. Int. J. Antimicrob. Agents 37, 373–376. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2010.11.036
Jenkins, R., Burton, N. și Cooper, R. (2013). Analiza proteomică și genomică a Staphylococcus aureus rezistent la meticilină (MRSA), expus la miere de Manuka in vitro, a demonstrat reglarea descendentă a markerilor de virulență. J. Antimicrobial Chemother. 69, 603–615. doi: 10.1093/jac/dkt430
Jenkins, R. și Cooper, R. (2012). Îmbunătățirea activității antibioticelor împotriva agenților patogeni ai rănilor cu miere Manuka in vitro. PLoS ONE 7:e45600. doi: 10.1371/journal.pone.0045600
Jenkins, R., Roberts, A. și Brown, H. L. (2015a). Despre efectele antibacteriene ale mierii Manuka: perspective mecanistice. Res. Rep. Biol. 6, 215–224. doi: 10.2147/RRB.S75754
Jenkins, R., Wootton, M., Howe, R. și Cooper, R. (2015b). Demonstrarea sensibilității izolatelor clinice obținute de la pacienți cu fibroză chistică la mierea Manuka. Arch. Microbiol. 197, 597–601. doi: 10.1007/s00203-015-1091-6
Kalapos, M. P. (2008). Tandemul radicalilor liberi și al metilglioxalului. Chem. Biol. Interact. 171, 251–271. doi: 10.1016/j.cbi.2007.11.009
Kato, Y., Umeda, N., Maeda, A., Matsumoto, D., Kitamoto, N. și Kikuzaki, H. (2012). Identificarea unei glicozide noi, le puedo?
Kilty, S. J., Duval, M., Chan, F. T., Ferris, W. și Slinger, R. (2011). Metilglioxalul: (agentul activ al mierii Manuka) activitate in vitro împotriva biofilmelor bacteriene. Int. Forum Allergy Rhinol. 1, 348–350. doi: 10.1002/alr.20073
Kronda, J. M., Cooper, R. A. și Maddocks, S. E. (2013). Mierea de Manuka inhibă producția de siderofori la Pseudomonas aeruginosa. J. Appl. Microbiol. 115, 86–90. doi: 10.1111/jam.12222
Kwakman, P. H., te Velde, A. A., de Boer, L., Vandenbroucke-Grauls, C. M. și Zaat, S. A. (2011). Două tipuri importante de miere medicinală au mecanisme diferite de acțiune bactericidă. PLoS ONE 6:e17709. doi: 10.1371/journal.pone.0017709
Lee, J.-H., Park, J.-H., Kim, J.-A., Neupane, G. P., Cho, M. H., Lee, C.-S. și colab. (2011). Concentrațiile scăzute de miere reduc formarea biofilmului, detectarea cvorumului și virulența la Escherichia coli O157: H7. Biofouling 27, 1095–1104. doi: 10.1080/08927014.2011.633704
Lin, S. M., Molan, P. C. și Cursons, R. T. (2011). Sensibilitatea controlată in vitro a agenților patogeni gastrointestinali la efectul antibacterian al mierii de Manuka. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 30, 569–574. doi: 10.1007/s10096-010-1121-x
Liu, M., Lu, J., Müller, P., Turnbull, L., Burke, C. M., Schlothauer, R. C. și colab. (2014). Diferențele specifice antibioticelor în răspunsul Staphylococcus aureus la tratamentul cu antimicrobiene combinate cu miere de Manuka. Front. Microbiol. 5:779. doi: 10.3389/fmicb.2014.00779
Lu, J., Carter, D. A., Turnbull, L., Rosendale, D., Hedderley, D., Stephens, J. și colab. (2013). Efectul mierilor de kanuka, Manuka și trifoi din Noua Zeelandă asupra dinamicii creșterii bacteriene și morfologiei celulare variază în funcție de specie. PLoS ONE8:e55898. doi: 10.1371/journal.pone.0055898
Lu, J., Turnbull, L., Burke, C. M., Liu, M., Carter, D. A., Schlothauer, R. C. și colab. (2014). Mierile de tip Manuka pot eradica biofilmele produse de tulpini de Staphylococcus aureus cu diferite capacități de formare a biofilmului. PeerJ 2:e326. doi: 10.7717/peerj.326
Maddocks, S. E., Jenkins, R. E., Rowlands, R. S., Purdy, K. J. și Cooper, R. A. (2013). Mierea Manuka inhibă aderarea și invazia bacteriilor importante din punct de vedere medical, asociate rănilor, in vitro. Fut. Microbiol. 8, 1523–1536. doi: 10.2217/fmb.13.126
Maddocks, S. E., Lopez, M. S., Rowlands, R. S. și Cooper, R. A. (2012). Mierea Manuka inhibă dezvoltarea biofilmelor de Streptococcus pyogenes și determină reducerea expresiei a două proteine de legare a fibronectinei. Microbiology 158, 781–790. doi: 10.1099/mic.0.053959-0
Majtan, J. (2014). Mierea: un imunomodulator în vindecarea rănilor. Wound Repair Regenerat. 22, 187–192. doi: 10.1111/wrr.12117
Majtan, J., Bohova, J., Horniackova, M., Klaudiny, J. și Majtan, V. (2014a). Efectele antibiofilm ale mierii împotriva agenților patogeni ai plăgilor Proteus mirabilis și Enterobacter cloacae. Phytother. Res. 28, 69–75. doi: 10.1002/ptr.4957
Majtan, J., Bohova, J., Prochazka, E. și Klaudiny, J. (2014b). Metilglioxalul poate afecta acumularea peroxidului de hidrogen în mierea de Manuka prin inhibarea glucozoxidazei. J. Med. Food 17, 290–293. doi: 10.1089/jmf.2012.0201
Majtan, J., Klaudiny, J., Bohova, J., Kohutova, L., Dzurova, M., Sediva, M. și colab. (2012). Modificări induse de metilglioxal ale componentelor proteice semnificative ale albinei melifere în mierea de Manuka: posibile implicații terapeutice. Fitoterapia 83, 671–677. doi: 10.1016/j.fitote.2012.02.002
Majtan, J., Majtanova, L., Bohova, J. și Majtan, V. (2011). Mierea de mană ca agent antibacterian potent pentru eradicarea izolatelor multirezistente la medicamente de Stenotrophomonas maltophilia de la pacienți cu cancer. Phytother. Res. 25, 584–587. doi: 10.1002/ptr.3304
Malone, L. A., Gatehouse, H. S. și Tregidga, E. L. (2001). Efectele timpului, temperaturii și mierii asupra Nosema apis(Microsporidia: Nosematidae), un parazit al albinei melifere, Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae). J. Invertebrate Pathol. 77, 258–268. doi: 10.1006/jipa.2001.5028
Mavric, E., Wittmann, S., Barth, G. și Henle, T. (2008). Identificarea și cuantificarea metilglioxalului ca principal constituent antibacterian al mierii Manuka (Leptospermum scoparium) din Noua Zeelandă. Mol. Nutrit. Food Res. 52, 483–489. doi: 10.1002/mnfr.200700282
Molan, P. M. (2008). O explicație a motivului pentru care nivelul MGO din mierea Manuka nu indică activitatea antibacteriană. New Zealand Beekeeper 16, 11–13.
Mullai, V. și Menon, T. (2007). Activitatea bactericidă a diferitelor tipuri de miere împotriva izolatelor clinice și de mediu de Pseudomonas aeruginosa. J. Alternat. Complement. Med. 13, 439–442. doi: 10.1089/acm.2007.6366
Müller, P., Alber, D. G., Turnbull, L., Schlothauer, R. C., Carter, D. A., Whitchurch, C. B. și colab. (2013). Sinergia dintre Medihoney și rifampicină împotriva Staphylococcus aureus rezistent la meticilină (MRSA). PLoS ONE 8:e57679. doi: 10.1371/journal.pone.0057679
Mundo, M. A., Padilla-Zakour, O. I. și Worobo, R. W. (2004). Inhibarea dezvoltării agenților patogeni de origine alimentară și a microorganismelor responsabile de alterarea alimentelor de către anumite tipuri de miere crudă. Int. J. Food Microbiol. 97, 1–8. doi: 10.1016/j.ijfoodmicro.2004.03.025
Nilforoushzadeh, M. A., Jaffary, F., Moradi, S., Derakhshan, R. și Haftbaradaran, E. (2007). Efectul aplicării topice a mierii împreună cu injectarea intralezională de glucantim în tratamentul leishmaniozei cutanate. BMC Complement Altern. Med. 7:1. doi: 10.1186/1472-6882-7-1
Norton, A. M., McKenzie, L. N., Brooks, P. R. și Pappalardo, L. J. (2015). Cuantificarea dihidroxiacetonei din nectarul australian de Leptospermum prin cromatografie lichidă de înaltă performanță. J. Agric. Food Chem. 63, 6513–6517. doi: 10.1021/acs.jafc.5b01930
Okhiria, O., Henriques, A., Burton, N., Peters, A. și Cooper, R. (2009). Mierea modulează biofilmele de Pseudomonas aeruginosa într-o manieră dependentă de timp și doză. J. ApiProduct. ApiMedical Sci. 1, 6–10. doi: 10.3896/IBRA.4.01.1.03
Osato, M. S., Reddy, S. G. și Graham, D. Y. (1999). Efectul osmotic al mierii asupra creșterii și viabilității bacteriei Helicobacter pylori. Dig. Dis. Sci. 44, 462–464. doi: 10.1023/A:1026676517213
Packer, J. M., Irish, J., Herbert, B. R., Hill, C., Padula, M., Blair, S. E. și colab. (2012). Efectul antibacterian specific, independent de peroxid, al mierii Manuka asupra proteomului bacteriei Staphylococcus aureus. Int. J. Antimicrob. Agents 40, 43–50. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2012.03.012
Regulski, M. (2008). Un pansament nou pentru îngrijirea rănilor în cazul ulcerațiilor cronice ale picioarelor. Podiatry Manag. 27, 235–246.
Roberts, A. E., Maddocks, S. E. și Cooper, R. A. (2012). Mierea Manuka este bactericidă împotriva Pseudomonas aeruginosa și determină expresia diferențială a oprF și algD. Microbiology 158, 3005–3013. doi: 10.1099/mic.0.062794-0
Roberts, A. E. L., Maddocks, S. E. și Cooper, R. A. (2015). Mierea Manuka reduce motilitatea Pseudomonas aeruginosa prin reprimarea genelor asociate flagelilor. J. Antimicrob. Chemother. 70, 716–725. doi: 10.1093/jac/dku448
Sajid, M. și Azim, M. K. (2012). Caracterizarea activității nematicide a mierii naturale. J. Agric. Food Chem. 60, 7428–7434. doi: 10.1021/jf301653n
Shahzad, A. și Cohrs, R. J. (2012). Activitatea antivirală in vitro a mierii împotriva virusului varicelo-zosterian (VZV): un studiu de medicină translațională privind un posibil remediu pentru zona zoster. Transl. Biomed. 3:2.
Sherlock, O., Dolan, A., Athman, R., Power, A., Gethin, G., Cowman, S. și colab. (2010). Compararea activității antimicrobiene a mierii Ulmo din Chile și a mierii Manuka împotriva Staphylococcus aureus rezistent la meticilină, Escherichia coli și Pseudomonas aeruginosa. BMC Complement Altern. Med. 10:47. doi: 10.1186/1472-6882-10-47
Silva-Rocha, R. și de Lorenzo, V. (2010). Zgomotul și robustețea rețelelor de reglare procariotă. Annu. Rev. Microbiol. 64, 257–275. doi: 10.1146/annurev.micro.091208.073229
Smith, T., Hanft, J. R. și Legel, K. (2009). Miere de Leptospermum pentru aplicare topică în plăgi venoase recalcitrante ale picioarelor: o serie preliminară de cazuri. Adv. Skin Wound Care 22, 68–71. doi: 10.1097/01.ASW.0000345283.05532.9a
Soffer, A. (1976). Chihuahua și laetrilă, terapia de chelare și mierea din Boulder, Colorado [editorial]. Arch. Intern. Med.136, 865–866. doi: 10.1001/archinte.136.8.865
Sojka, M., Valachova, I., Bucekova, M. și Majtan, J. (2016). Eficacitatea antibiofilm a mierii și a defensinei-1 derivată de la albine asupra biofilmului polimicrobian al plăgilor. J. Med. Microbiol. doi: 10.1099/jmm.0.000227 [publicat online înaintea tipăririi].
Stephens, J. M., Schlothauer, R. C., Morris, B. D., Yang, D., Fearnley, L., Greenwood, D. R. și colab. (2010). Compuși fenolici și metilglioxal în unele tipuri de miere Manuka și Kanuka din Noua Zeelandă. Food Chem. 120, 78–86. doi: 10.1016/j.foodchem.2009.09.074
Tan, H. T., Rahman, R. A., Gan, S. H., Halim, A. S., Hassan, S. A., Sulaiman, S. A. și colab. (2009). Proprietățile antibacteriene ale mierii tualang din Malaezia împotriva microorganismelor din răni și a microorganismelor enterice, comparativ cu mierea Manuka. BMC Complement Altern. Med. 9:34. doi: 10.1186/1472-6882-9-34
Watanabe, K., Rahmasari, R., Matsunaga, A., Haruyama, T. și Kobayashi, N. (2014). Efectele antivirale împotriva gripei ale mierii in vitro: activitate ridicată și puternică a mierii de manuka. Arch. Med. Res. 45, 359–365. doi: 10.1016/j.arcmed.2014.05.006
Wilkinson, J. M. și Cavanagh, H. M. A. (2005). Activitatea antibacteriană a 13 tipuri de miere împotriva Escherichia coli și Pseudomonas aeruginosa. J. Med. Food 8, 100–103. doi: 10.1089/jmf.2005.8.100
Williams, S., King, J., Revell, M., Manley-Harris, M., Balks, M., Janusch, F. și colab. (2014). Variații regionale, anuale și individuale ale conținutului de dihidroxiacetonă din nectarul de manuka (Leptospermum scoparium) din Noua Zeelandă. J. Agric. Food Chem. 62, 10332–10340. doi: 10.1021/jf5045958
Willix, D. J., Molan, P. C. și Harfoot, C. G. (1992). O comparație a sensibilității speciilor bacteriene care infectează rănile la activitatea antibacteriană a mierii de Manuka și a altor tipuri de miere. J. Appl. Bacteriol. 73, 388–394. doi: 10.1111/j.1365-2672.1992.tb04993.x
Windsor, S., Pappalardo, M., Brooks, P., Williams, S. și Manley-Harris, M. (2012). O nouă metodă convenabilă de analiză a dihidroxiacetonei și metilglioxalului aplicată mierilor australiene de Leptospermum. J. Pharmacogn. Phytother. 4, 6–11.
Sursă: Mierea terapeutică de Manuka: nu mai este chiar atât de alternativă - https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2016.00569/full
Lasă un comentariu